細菌的細胞壁組分在細菌氣相層析實驗顯微鏡
氣相層析法測定代謝酸產(chǎn)物
厭氧菌的終末代謝產(chǎn)物有揮發(fā)性脂肪酸、非揮發(fā)性脂肪酸、醇類等
,患有這些代謝產(chǎn)物的樣品中各個組分的沸點、極性等不同。樣品被氣
化后由載氣帶帶入層析柱中進行分析時,各組分就在兩相之間(氣相和
液相)反復分配(即吸附-洗脫)。由于層析柱中固定相對各組分的吸附
情況不同,因此各組分在層析柱中的運行速度也不同,彼此分離,有序地
離開層析柱進入檢測器,各組分的保留時間和出峰順序也不同。根據(jù)層
析峰出峰順序、保留時間可以確定組分中物質(zhì)的種類,根據(jù)層析峰面積
和大小可以確定組分中物質(zhì)的含量。氣相層析法測定代謝產(chǎn)物的具體
方法是:將待測細菌接種于PYG培養(yǎng)基中,于37℃厭氧培養(yǎng)24~48小時,將
培養(yǎng)物制成揮發(fā)性或非揮發(fā)性脂肪酸樣品,按儀器型號要求取1~4μL樣
品注入,進行氣相分析。
高效液相層析法測定代謝酸產(chǎn)物高效液相層析法又稱高效液相色
譜法(HPLC),是在經(jīng)典液相層析法基礎上和氣相層析理論的基礎上發(fā)展
起來的,由于其分離能力強、測定靈敏度高并可在室溫下進行,因此在
口腔醫(yī)學的研究中也開始得到廣泛應用
細菌細胞壁和細胞膜組分分析
細菌的細胞壁和細胞膜組分在細菌的種系發(fā)生上占有特殊的地位,
通過分析這些化學組分可進行細菌的分類和鑒定。
全細胞水解物組分分析全細胞水解產(chǎn)物的組分分析主要包括分析
一些存在于細胞壁的高分子化學組分,如二氨基庚二酸的異構物及阿拉
伯糖等。該法簡單能迅速獲得結果,在放線菌及其他革蘭陽性的桿菌的
分類和鑒別上很有意義。、純細胞壁制備的組分分析
(1)純細胞壁的制備收集適當培養(yǎng)調(diào)價下生長的細菌細胞,破碎細胞
壁,通過酶解不同速度離心去掉雜質(zhì),得到純的細胞壁制備物。
(2)純細胞壁的組分分析將收集的純細胞壁脫水后用酸水解,再用紙
層析或薄層層析其中的胞壁糖和氨基酸等組分。
