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增菌培養(yǎng)物實(shí)驗(yàn)樣品鏡檢高倍光學(xué)顯微鏡




來(lái)源:yiyi
時(shí)間:2020-5-20 20:37:17

增菌培養(yǎng)物實(shí)驗(yàn)樣品鏡檢高倍光學(xué)顯微鏡


    增菌培養(yǎng)物,按以下步驟進(jìn)行操作。
    (1)涂片  取一接種環(huán)上述培養(yǎng)物涂布于潔凈載玻片上,并在左上
角編號(hào),室溫干燥。
    (2)加沙門氏菌多價(jià)O血清和桿菌肽  上述玻片標(biāo)本上各滴加沙門
氏菌多價(jià)O血清工作稀釋液1滴,立即加入1滴桿菌肽溶液
    鏡檢與結(jié)果
    上述玻片標(biāo)本,以高倍顯微鏡觀察結(jié)果。在檢樣中如有沙門氏菌
存在,菌形呈紡錘形,其大小比原菌大2~4倍,以橫徑膨脹更為明顯
。菌體呈鮮艷藍(lán)色,有些菌體為兩極濃染。菌體壁變薄,有扁平感,
失去很強(qiáng)的折光性。視野中未發(fā)現(xiàn)免疫染色特征的菌株者,被檢樣品
中未發(fā)現(xiàn)沙門氏菌。對(duì)比沙門氏菌使用免疫染色法處理的標(biāo)本,具有
免疫染色的特征,非沙門氏菌的對(duì)比免疫染色,無(wú)此特征。普通染色
液染色的沙門氏菌,具有該染色液染色的特征,菌體刁;膨脹,體壁
與折光性無(wú)異常。
    熒光抗體法
    主要儀器和試劑
    (1)顯微鏡玻片  無(wú)自發(fā)熒光,厚度0.8~1.2mm,在玻片的一面
刻有號(hào)碼及8個(gè)方格(上下兩列,每列:格)。每次使用前,必須用洗滌
劑徹底除盡油污,并擦洗干凈,經(jīng)滴水檢查,確實(shí)無(wú)油污后方可使用

    (2)熒光顯微鏡  熒光顯微鏡由電器和燈室兩部分組成,油浸暗視
野集光器系統(tǒng)。國(guó)產(chǎn)有超高壓汞燈熒光光源裝置和高色溫溴鎢燈熒光
顯微光源裝置,配有一架普通顯微鏡即可使用。
    熒光抗體試劑必須低溫保存(4℃左右),稀釋后的試劑,應(yīng)分成小
批,冰凍貯存。在每批試劑首次使用前,或稀釋并存放較長(zhǎng)時(shí)間后,
應(yīng)用幾個(gè)不同抗原的已知沙門氏菌測(cè)定試劑的效價(jià),并確定或校正其
工作滴度。染色效價(jià),即能使所染菌株呈4+熒光強(qiáng)度的最大稀釋倍數(shù)
,低于染色效價(jià)一個(gè)滴度的試劑稀釋倍數(shù),為其工作淌度。

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