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選購熒光顯微鏡選購濾光片指導說明




來源:責任編輯:yiyi
時間:2011-7-19 11:45:47

選購熒光顯微鏡選購濾光片指導說明

(本文由顯微鏡報價網(wǎng)審核通過)

首先在做實驗事前研究人員會先確定所用染料然后選擇熒光激發(fā)塊。
緣由:
1、做實驗之前通常都已經(jīng)查閱了大量的文獻資料,然后根據(jù)參考文獻你知道哪幾種染料可以用在你將要實驗的標本上,再從中挑選較適合你的實驗設計的染料,選定了染料之后再確定你要使用的熒光激發(fā)塊;
2、另外,你所說的紅光或綠光其實是指熒光的發(fā)射光的顏色,根據(jù)熒光的原理:熒光的產(chǎn)生是由于某些物質(zhì)的分子受到光刺激之后發(fā)生了能級變化,即分子中的原子受到光刺激后(吸收了能量)從低能級狀態(tài)躍遷到高能級狀態(tài),由于高能級狀態(tài)很不穩(wěn)定,很容易回到低能級狀態(tài),根據(jù)能量守恒定律,從高能級狀態(tài)回復到低能級狀態(tài)的時候必然有能量的釋放(以輻射的形式),因此就有光的產(chǎn)生,這種光就是我們通常說的熒光。所以熒光的產(chǎn)生簡單地說就是stroke法則:短波長的光激發(fā)產(chǎn)生長波長的光。這就是通常我們說的紫外激發(fā)產(chǎn)生藍光,藍光激發(fā)產(chǎn)生綠光,綠光激發(fā)產(chǎn)生紅光。所以如果你用的染料是DAPI(發(fā)藍光),你就要選用紫外激發(fā)塊,如果你選擇GFP(綠光),你就要選用藍色激發(fā)塊以此類推。

熒光顯微鏡與普通顯微鏡的區(qū)分有三個不同點:

1.照明方式是為落射式,即光源通過物鏡投射于樣品上;   

2.光源為紫外光,波長較短,分辨力是高出普通顯微鏡;   

3.有兩個濾光片,一個濾光片用于濾除可見光,目鏡和物鏡之間的濾光片用于濾除紫外線,保護眼睛。   

熒光顯微鏡其實同是屬于光學顯微鏡這個類別的,主要的不同在于是二者的激發(fā)波長區(qū)別。造成熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡組成結構和操作方式的不同。

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